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LOH12CR1互作蛋白PSME1的鉴定

发布时间:2020-01-17 07:42
【摘要】:目的:LOH12CR1是由本课题组在2008年筛选到的LKB1羧基端互作蛋白,LOH12CR1位于12号染色体短臂杂合子缺失区域,进化上高度保守,编码的蛋白亚细胞定位于胞浆和少量细胞核内,但其具体作用机制尚不明确。PSME1是2011年本课题组初步筛选出LOH12CR1的互作蛋白,其主要功能是增加20S蛋白酶体的蛋白降解活性和参与主要组织相容性复合体aI(MHC-I)类分子限制性抗原提呈。本研究将验证LOH12CR1与PSME1是否存在真正的蛋白质互作关系,为LOH12CR1的功能研究提供新的方向。 方法:本研究将构建的pCDNA3.1-myc-LOH12CR1和pCMV-tag2B-PSME1重组质粒共同转染HEK293T细胞,通过免疫共沉淀技术验证LOH12CR1与PSME1的蛋白互作关系。通过免疫荧光实验和激光共聚焦检测验证LOH12CR1与PSME1亚细胞定位情况。 结果:经免疫共沉淀技术证实PSME1是LOH12CR1的互作蛋白。经免疫荧光实验和激光共聚焦检测初步证实LOH12CR1与PSME1存在亚细胞共定位,且主要共定位于胞浆。 结论:PSME1是LOH12CR1互作蛋白,提示LOH12CR1可能参与了蛋白质降解和主要组织相容性复合体I(MHC-I)类分子限制性抗原提呈过程,这些假设我们将在后续的研究中加以验证。
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R392.1

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