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细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗构建及其免疫机制研究

发布时间:2019-08-01 11:53
【摘要】: 目的 制作细粒棘球蚴BALB/c鼠模型,从细粒棘球绦虫原头节扩增Eg95蛋白编码基因,克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体pBCG,电穿孔转化BCG,构建细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗,探讨Eg95抗原在重组BCG中的表达效率;用该疫苗免疫BALB/c小鼠,动态观察免疫小鼠血清IgEIgG及其亚类的变化规O摚黄细胞CD4+和CD8+亚群变化,以及脾细胞培养上清液IL-2IL-4IFN-γ和TNF-α变化水平;通过不同的免疫途径接种疫苗,在原头节攻击后,观察实验动物产生的保护力和检测血清IgEIgG及其亚类;脾T细胞CD4+和CD8+亚群变化,脾细胞培养上清液IL-2IL-4IFN-γ和TNF-α水平,以及脾细胞的凋亡,从而初步阐述其保护性免疫机制,为CE疫苗的开发利用提供依据。 方法 以BALB/c鼠作为宿主,用腹腔注射Eg原头节的方法制作细粒棘球蚴BALB/c模型。从Eg包囊中分离原头节,超声粉碎后抽提总RNA作为模板。根据Genbank(AF199354)基因序列,自行设计一对引物并加入内切酶位点,采用RT-PCR方法扩增Eg95编码基因并鉴定,将
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R392

【参考文献】

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