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冷—束缚应激诱导肠功能紊乱大鼠模型建立及肠粘膜屏障变化和肠粘膜IL-1β和IL-4表达的研究

发布时间:2019-01-11 20:25  文章来源:笔耕文化传播
【摘要】: 肠易激综合征irritable bowel syndrome,IBS㖞是临床最常见的功能性肠病,其发病机制尚不完全明确。建立理想的动物实验模型不仅有利于肠易激综合征发病机制的研究,而且有助于指导临床的合理治疗。对非选择性肠易激综合征患者深入研究发现肠道粘膜存在炎症反应,有动物试验表明应激诱导的动物,肠粘膜屏障受到破坏,粘膜通透性增加可能是炎症发生重要因素。目前有关肠功能紊乱动物模型肠粘膜屏障变化情况的研究还未见报道,本实验在成功制备大鼠肠功能紊乱模型的基础上,进行此方面的相关研究,探讨肠粘膜屏障变化在肠功能紊乱发病机制中可能作用及检测肠粘膜IL-1β、IL-4表达,为进一步研究IBS发病机制及治疗提供一个新的方向。 目的:建立冷-束缚应激诱导肠功能紊乱大鼠模型,探讨肠粘膜屏障变化及肠粘膜IL-1β、IL-4在动物模型肠功能紊乱发病机制中的可能作用。 方法:①动物模型制备及观察方法:选取2月龄Wistar大鼠40只,随机分成模型组和正常对照组。模型组采用寒冷加束缚为应激源实施干预,即将大鼠放入大鼠束缚器内固定,部分限制其上半身及上肢活动,在此基础上将大鼠正立位置于8℃-10℃冷水内寒冷刺激,水面达到其胸骨剑突水平。应激过程中注意观察大鼠反应,当大鼠出现呼吸浅慢、双目紧闭时,便停止对其刺激,大鼠对每次应激耐受时间为0.5-1.5h不等,应激每天1次,持续5天。为消除生物节律对实验结果的影响,均于上午9时开始实施应激。对照组不予任何干预。实验期间观察两组大鼠粪便性状,应用Bristol分型进行评分、于第6天利用直结肠扩张实验测定内脏敏感性、第7天肠粘膜通透性检测结束后,两组大鼠行远端结肠及小肠粘膜病理检查并采用免疫组化S-P法检查肠粘膜IL-1β、IL-4表达。②肠粘膜屏障变化实验研究:采用气相色谱法,于实验第7天检测两组大鼠5h尿液中乳果糖lactulose,L㖞和甘露醇mannital,M㖞排泄率比值L?M㖞和24h尿液中三氯蔗糖sucralose,S㖞总的排泄量,比较肠粘膜通透性大小,以此反映肠粘膜屏障的变化情况。 结果:①模型组大鼠粪便多为软的团块状或泥浆样,Bristol分型评分为5.2±0.8;对照组多为柔软的香肠状或团块状,Bristol分型评分为2.8±0.8,Bristol分型评分比较有显著性差异P0.05㖞;直肠球囊扩张实验测定内脏敏感性结果显示,模型组初始感觉阈值、疼痛感觉阈值、最大耐受阈值分别较对照组显著降低0.37±0.16 vs 0.58±0.05,0.89±0.30 vs 1.48±0.10,1.26±0.33 vs 2.00±0.08㖞,差异有统计学意义P0.05㖞。模型组和对照组肠粘膜病理检查未见明显异常。②模型组大鼠5h尿液中L与M排泄率比值L?M㖞、24h尿液中S总的排泄量较对照组大鼠显著增大0.74±0.06 vs 0.51±0.05,5.31±0.59 vs 3.81±0.58㖞,差异有统计学意义P0.05㖞。③模型组远端结肠及小肠粘膜IL-1β表达均较对照组明显增加P0.05㖞,IL-4表达与对照组无明显差异P0.05㖞。 结论:①采用冷-束缚应激方法成功建立了大鼠肠功能紊乱动物模型。②肠功能紊乱大鼠肠粘膜通透性增大,肠粘膜屏障受损,粘膜通透性增大可能与肠功能紊乱发病机制有关。③肠功能紊乱大鼠肠粘膜表达IL-1β增加、IL-4表达未见异常,表明肠功能紊乱大鼠肠粘膜可能存在低度的炎症反应。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R574;R-332

【参考文献】

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