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卵巢衰老相关基因的功能验证和机制探讨

发布时间:2021-02-24 00:15
  背景与目的随着卵巢的衰老,女性不仅丧失生育能力,更并发严重的围绝经期症状如潮热、泌尿生殖道萎缩症状以及心脑血管系统、神经精神系统等疾病和骨折的高发风险,对女性身心健康造成重大危害。前期通过基因芯片筛选出一系列卵巢衰老关键基因,在基因和蛋白水平对相关基因的表达进行验证,并通过体内外实验对相关基因作用机制进行深入探讨。方法参考早期芯片结果以及文献中衰老相关基因,通过实时定量PCR和Western blot验证相关基因的表达;通过小鼠卵巢囊内siRNA注射,下调关键基因表达,以及体外关键基因对应单克隆抗体、重组蛋白调控关键基因对应下游细胞信号通路;通过HE染色、TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)、western blot、酶联荧光分析(enzyme linked fluoreseent assay,ELFA)、实时定量PCR、免疫荧光检测关键基因对小鼠卵巢中卵泡组成、颗粒细胞凋亡、分化和激素分泌的影响,以及卵巢关键功能基因及蛋白的表达;运用光学显微镜、激光共聚焦显微镜观察关键基因对卵巢中卵泡组成、颗粒细胞凋亡以及功能蛋白表达的影响。结果(1)... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:126 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
中文摘要
Abstract
前言
    参考文献
第一部分 卵巢衰老相关基因 898a 的表达验证和功能探讨
    一 898a 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 结果
        3. 讨论
        参考文献
    二 体内下调 898a 导致卵泡闭锁增加始基卵泡耗竭加速
        摘要
        Abstract
        前言
        1.材料和方法
        2. 结果
        3. 讨论
        参考文献
    三 898a 通过抑制颗粒细胞终末分化维持 AMH 表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 结果
        3. 讨论
        参考文献
第二部分 Peroxiredoxins mRNA 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
    一 Peroxiredoxin ⅠmRNA 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
        中文摘要
        英文摘要
        前言
        1 材料和方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    二 Peroxiredoxin Ⅲ mRNA 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 结果
        3. 讨论
        参考文献
    三 Peroxiredoxin Ⅳ mRNA 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 结果
        3. 讨论
        参考文献
    四 Peroxiredoxin Ⅴ mRNA 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1.材料和方法
        2.结果
        3.讨论
        参考文献
    五 Peroxiredoxin Ⅵ mRNA 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1.材料和方法
        2.结果
        3.讨论
        参考文献
第三部分 Neuropilin-1 在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达
    一 Neuropilin-1 mRNA 在不同动情周期及周龄阶段小鼠卵巢中的表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1 材料和方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    二 Neuropilin-1mRNA 在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
综述一 卵泡的发生、成熟与退化
    参考文献
综述二 免疫细胞衰老在卵巢衰老过程中的作用
    参考文献
附录 研究生阶段发表论文
致谢



本文编号:3048470

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